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凝胶色谱法的操作步骤(凝胶色谱法的基本操作过程)

来源:原点资讯(m.360kss.com)时间:2024-05-16 04:41:52作者:YD166手机阅读>>

原理:

以多孔性物质作固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力(吸附、分配和离子交换等),因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内,迅速流出色谱柱,不能被分离。比固定相孔径小的分子才能进入孔内而产生保留,溶质分子体积越小,进入固定相孔内的机率越大,于是在固定相中停留(保留)的时间也就越长。

固定相:

化学惰性的多孔性材料,如聚苯乙烯凝胶、亲水凝胶、无机多孔材料。

流动相:

在凝胶色谱中,流动相的作用不是为了控制分离,而是为了溶解样品或减小流动相粘度。

凝胶过滤色谱(gel filtration chromatography,GFC): 以水或缓冲溶液作流动相的凝胶色谱法。主要适合于水溶性高分子的分离。

凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC): 以有机溶剂作流动相的凝胶色谱法。主要适合于脂溶性高分子的分离。如甲苯和四氢呋喃能很好地溶解合成高分子,所以GPC主要用于合成高分子的分子量(分布)的测定。

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