李斯特菌鉴别基础培养基
HiCynth™
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MCD1540
李斯特菌鉴别基础培养基 HiCynth™
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描述
HiCynth™李斯特菌鉴别培养基推荐用于选择性鉴别分离单核细胞增生性李斯特菌。
组成
成分 g/L
HiCynth™蛋白胨1号 24.000
HiCynth™蛋白胨5号 10.000
丙酮酸钠 2.000
葡萄糖 2.000
甘油磷酸镁 1.000
硫酸镁 0.500
氯化钠 5.000
氯化锂 10.000
无水磷酸氢二钠 2.500
显色底物 0.050
琼脂 15.000
最终pH（25℃） 7.2±0.2
使用指导
在460ml蒸馏水中重悬36.02g培养基干粉。必要时加热以完全溶解。高压灭菌（15磅121℃，15分钟）。冷却至45-50℃。无菌加入1管无菌的李斯特菌增菌添加剂I（FD214）和李斯特菌选择性水化添加剂I（FD212）和添加剂II（FD213）。混匀，倒入无菌培养皿中。
警告：氯化锂有害。避免身体接触和吸入蒸气。一旦与皮肤接触，需用大量水冲洗。
原理和说明
单核细胞增多性李斯特菌是一种革兰氏阳性的食源性人类病原体。孕妇的严重感染，可能最终导致流产、死胎、新生儿李斯特菌病和脑膜炎或成人和青少年的原发性菌血症。绵羊李斯特杆菌对人类的致病性不确定。由于单核细胞增生性李斯特菌和英诺克李斯特菌具有相似的生物化学性质，它们不能在传统培养基（PALCAM，Oxford）上区分。 李斯特菌鉴别培养基由Ottoviani和Agosti1,2制备，用于从食品和动物饲料中选择性鉴别分离单核细胞增生性李斯特菌，被ISO委员会采用3。HiCynth™李斯特菌鉴别培养基用化学限定的蛋白胨完全取代了动物蛋白胨或植物蛋白胨，避免了与动物蛋白胨相关的海绵状脑病风险。
HiCynth™蛋白胨No.1和HiCynth™蛋白胨5号提供氮源和碳源物质、长链氨基酸、维生素和必需的生长营养素。丙酮酸钠支持良好的生长。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。氯化钠保持渗透平衡。磷酸盐起缓冲作用。氯化锂和添加的选择性添加剂（FD212和FD213）抑制伴随生长的微生物群落，却允许李斯特菌的生长。
李斯特菌水解显色底物，产生绿色菌落。单核细胞增多性李斯特菌和来自其他李斯特菌的鉴别是基于磷脂酰肌醇特异性的磷脂酶C活性。磷脂酶C水解添加到培养基中的纯化的底物（FD214），导致单核细胞增生李斯特菌菌落周围产生出不透明的光晕。
质量控制
外观
乳黄色均一松散粉末
成胶性
结实，相当于1.5%的琼脂糖凝胶
制备的培养基颜色和透明度
平皿上为浅琥珀色透明凝胶
pH值（25℃）
7.00-7.40
培养反应
添加单核细胞增生性李斯特菌选择性添加剂I（FD212）、单核细胞增生性李斯特菌选择性添加剂II和单核细胞增生性李斯特菌增菌添加剂（FD214）后，在35℃-37℃培养24-48小时。
微生物
接种量（CFU）
生长状况
回收率
菌落颜色
磷脂酰肌醇特异性的磷脂酶C活性
白色念珠菌ATCC 10231
>=10³
抑制
0%
粪肠球菌ATCC 29212
>=10³
抑制
0%
大肠杆菌ATCC 25922
>=10³
抑制
0%
英诺克李斯特菌ATCC 33090
50-100
丰饶生长
>=50%
蓝绿色
阴性
格氏李斯特菌ATCC 19120
50-100
丰饶生长
>=50%
蓝绿色
阴性
绵羊李斯特菌ATCC 19119
50-100
丰饶生长
>=50%
蓝绿色
阳性，菌落周围有不透明光晕
单核细胞增生性李斯特菌ATCC 19112
50-100
丰饶生长
>=50%
蓝绿色
阳性，菌落周围有不透明光晕
西尔李斯特菌ATCC 35967
50-100
丰饶生长
>=50%
蓝绿色
阴性
威尔斯李斯特菌ATCC 43549
50-100
丰饶生长
>=50%
蓝绿色
阴性
绿脓杆菌ATCC 27853
>=10³
抑制
0%
储存和保质期
干粉保存在密闭容器中。配好后的培养基2-8℃保存。在标签上的截止日期前使用。
