基因检测是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术。取被检测者外周静脉血或其他组织细胞,扩增其基因信息后,通过特定设备对被检测者细胞中的DNA分子信息进行检测,分析其所含有的基因类型、基因缺陷及表达功能是否正常的一种方法,使人们能了解自己的基因信息,明确病因或预知身体患某种疾病的风险。
基因检测的方法有如下两种:
- PCR法,PCR是聚合酶链式反应的简称,是一种酶促化学反应;该法相对便宜而且能够报销,缺点是只能检测几个常见的位点,例如EGFR(表皮生长因子受体)等;但是EGFR突变大概占目前肺癌突变率的90%,通常只采用PCR法检测EGFR就相对足够了。L858R突变是EGFR基因中的一种突变类型,主要是指EGFR基因的第858的氨基酸,由原来的L(亮氨酸)突变成了R(精氨酸)。虽然无法单独根据L858R基因突变来判断患者的病情是否严重?一般而言L858R突变的患者可将EGFR靶向药作为治疗的一线药物,治疗效果相对较好。
- 二代测序法,也叫做NGS,Next-generation sequencing;NGS可以大规模地用一份标本检测多个基因的突变,甚至能够检测组织液和血液里的循环肿瘤细胞的突变。缺点就是相对比较昂贵。通常测七个基因左右大概需要3~5千元,测一百个以上基因的全基因组测序大概需要1~3万元。
*** 新冠病毒是一种冠状病毒科阳性单链RNA病毒,属于核酸,RNA都有特定的基因序列,在人体内检测到新冠病毒的特异序列的核酸即可识别新冠;新冠肺炎检测原理是以特定病毒基因为靶标,通过PCR扩增,核酸使靶标DNA序列指数级增加,扩增出来的DNA序列与荧光标记探针结合,产生荧光信号,而没有病毒的样本中就检测不到。
核酸(DNA或RNA)是病毒的遗传物质。提取“特殊”基因序列片段“放大”并且大量“复制”即可确定结果。
***新冠病毒核酸检测方法包括实时荧光PCR法(RT-PCR)和等温扩增法,以实时荧光PCR为主,首先需要用核酸提取试剂,对患者标本进行病毒核酸提取,核酸提取以后再加上PCR扩增试剂,用实时荧光PCR仪对提取的核酸进行扩增检测,扩增时间大概2个小时左右。
做完PCR后为什么要跑EP ?电泳(electrophoresis, EP)是电泳现象的简称,指的是带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。
PCR之后进行电泳的目的就是鉴定PCR是否扩增出预期产物。若是普通PCR,做完以后要通过电泳鉴定目的片段的大小是否为想要的?也可以看是否存在引物二聚体?借此优化PCR条。
PCR回收产物再电泳通常是在用PCR产物做完酶切之后进行,再电泳的目的是为了去掉那些消化酶和酶切完后的小分子,同时还要回收酶切产物。
基因鉴定为什么先要经过PCR技术?不可以直接进行鉴定吗?基因鉴定时一定要先经过PCR技术,直接进行鉴定是不行的。
基因鉴定技术是一项生物学检测技术,人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA,每个人的DNA都不完全相同,人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多,因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异,由此可以识别不同的人。所谓“DNA指纹”,就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质,因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。
基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交。这种分子杂交是在缓冲液中进行的,由于DNA分子杂交时,两个分子相遇的机会不是很大,所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子,而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段,所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的,而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。
DNA分析及DNA鉴定DNA分析主要用于识刖单个基因异常引发的遗传性疾病,如亨廷顿病等;DNA分析的细胞来自血液或胎儿细胞。